NATURE: 7. 5. 2015

NATURE: Postupné rakovinné mutace v kultuře lidských střevních kmenových buněk

"Kmenové buňky z krypt střevní sliznice představují buňky, které dávají vznik střevním neoplaziím. Myší i lidské střevní kmenové buňky mohou být kultivovány v médiu, které obsahuje pro kmenové buňky nutné složky jako faktor WNT (protein, díky němuž jsou aktivovány signální cesty, které se podílí na proliferaci a přežití kmenových buněk, funguje jako růstový faktor), R-spondin, EGF (epidermální růstový faktor, epidermal growth factor), mohou zde přežívat po dlouhou dobu jako epiteloidní organoidy (funkční střevní tkáň), které jsou geneticky i fenotypicky stabilní. V citované studii vědci využili připravenou výše zmíněnou kulturu a CRISPR/Cas9 technologii štěpení DNA, která cílila na 4 geny, které nejčastěji mají spojitost s rozvojem rakoviny střev, tj. APC, P53 (TP53), KRAS a SMAD4. Mutantní organoidy mohou být vybrány odebráním jednotlivých růstových faktorů z kultivačního média. Čtyřnásobně mutované buňky rostly nezávisle na odebraných faktorech nutných k růstu v médiu a tolerovaly i přítomnost stabilizátoru P53 Nutlinu 3. Po xenotransplantaci do myší, tyto čtyřnásobně mutované buňky rostly jako nádorová masa až do podoby invazivního karcinomu. Kombinovaná ztráta APC a P53 stačí k tomu, aby se u buněk vyvinula výrazná aneuploidie, tedy znak rakovinné progrese..."

http://www.nature.com/nature/journal/v521/n7550/full/nature14415.html